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        ELISA實驗中顯色淡,靈敏度偏低的原因

        日期:2023-09-29 23:03
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        摘要: 1. 試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高;所以盡量縮短運輸時間,夏季應放冰塊降溫。 2. 試劑盒未充分平衡;所以試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。 3. 培養箱溫度不足37℃,應注意培養箱溫度,放入反應板后盡量減少開啟次數以免影響溫度恒定,非隔水式培養箱尤其應注意。 4. 保溫時間不足;所以做實驗時一定注意時間的重要性,如果怕忘了時間,可以校正定時鐘準確定時。 5. 洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增加;按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數。 6. 移液器吸液量不足,吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔;所以保證校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內壁要清潔。 7. 蒸餾水水質有問題,要使用新鮮合格的蒸餾水。
        elisa法就是酶聯免疫吸附測定法的簡稱。elisa法可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,是一種敏感性高、特異性強、重復性好的定量的實驗診斷方法。其原理是采用抗原與抗體特異反應將待測物與酶連接,酶與底物產生顏色反應。在日常實驗中如果遇到顯色淡,靈敏度偏低是什么造成的呢?
         1. 試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高;所以盡量縮短運輸時間,夏季應放冰塊降溫。
         2. 試劑盒未充分平衡;所以試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。
         3. 培養箱溫度不足37℃,應注意培養箱溫度,放入反應板后盡量減少開啟次數以免影響溫度恒定,非隔水式培養箱尤其應注意。
         4. 保溫時間不足;所以做實驗時一定注意時間的重要性,如果怕忘了時間,可以校正定時鐘準確定時。
         5. 洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增加;按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數。
         6. 移液器吸液量不足,吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔;所以保證校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內壁要清潔。
         7. 蒸餾水水質有問題,要使用新鮮合格的蒸餾水。